Tle STL-Biochimie-Biologie DOCUMENT 2 1) Introduire environ 1,5 mL de culture de nuit d'E. coli à 37°C en milieu LB+ ampicilline (100µg/mL) dans un tube conique (eppendorf). Centrifuger 2 minutes à 14000 rpm. 2) Eliminer soigneusement le surnageant à la pipette automatique puis reprendre soigneusement le culot dans 100 μL de tampon TEG (25 mM de Tris HCI pH 8, 10mM EDTA, 50 mM glucose). 3) Laisser reposer 5 minutes à température ambiante. 4) Ajouter 200 μL de mélange NaOH/SDS (0,2 M NaOH, SDS 1% m/v). Mélanger par retournement. Laisser reposer à température ambiante 2-3 minutes 5) Ajouter 150 µL de tampon Acétate (0,2 M acétate de sodium, pH 4,8). Mélanger par retournement. Centrifuger 10 min à 14000 rpm. 6) Transférer le surnageant dans un tube eppendorf propre. 7) Ajouter 500 μL d'éthanol 100% glacé. Incuber 10 minutes à -20°C. 8) Centrifuger 3 minutes à 14000 rpm. 9) Eliminer le surnageant par aspiration. Attention à la position du culot +/- translucide. 10) Rincer le culot avec 500 µL d'éthanol à 70%. Centrifuger 1 minute à 14000 rpm. 11) Eliminer le surnageant. Bien laisser sécher le culot (au bec électrique). 12) Resuspendre le culot dans 30 µL d'eau distillée qualité biologie moléculaire ou tampon tris- EDTA (10 mM Tris-HCl, pH 8)
À partir du document retranscrit ci-dessus, pouvez vous m'aider à répondre à la question suivante s'il vous plaît ? La question c'est :
Expliquer comment est purifié L'ADN plasmidique.
